T7 DNA聚合酶

T7 DNA聚合酶

英文名称 ： T7 DNA Polymerase

分子量 ： 由2个亚基组成，804kDa多肽（T7噬菌体基因5表达产物）和12kDa硫氧还蛋白（大肠杆菌trxA基因表达产物）

级 别 ： BR

来 源 ： 两个大肠杆菌菌株，一个菌株含有T7噬菌体克隆基因5，另一个菌株含有大肠杆菌克隆基因trxA

保 存 ： -20°C

浓 度 ： 10u/ul

活力定义 ： 在37°C条件下，30分钟内能使10 nmol 的脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段（吸附在DE-81上）所需的酶量

活性分析混合物 ： 40mM Tris-HCL(PH7.5), 1mM DTT, 10mM MgCL2, 0.1mg/ml BSA, 0.033mM各种dNTP,0.4MBq/ML(3H)-dTTP和0.5mM碱性变性的牛胸腺DNA

保存缓冲液组分 ： 20mM 磷酸钾(PH7.4), 0.1mM EDTA, 1mM DTT和50%(v/v)甘油

10×反应缓冲液 ： 400mM Tris-HCL(PH7.5，25℃), 100mM MgCL2, 10mM DTT

抑制剂 ： 金属螯合剂，修饰试剂（无水醋酸和N-乙基顺丁烯二酰亚胺可使3'→5' 外切核酸酶失活，但不影响聚合酶活性

失 活 ： 75℃加热10分钟

质量控制 ： 测试表明无内切脱氧核糖核酸酶污染

使用注意 ： 37℃分析时需要短时间孵育

性 状 ： 悬浮液，重组酶。T7 DNA聚合酶是一种模板依赖型DNA聚合酶，催化5'→3'方向的DNA合成。该DNA聚合酶具有高持续合成能力，可持续合成长片段DNA。该酶对单链和双链DNA具有3'→5'外切核酸酶活性

用 途 ： 生化研究。除去残留的基因组DNA，纯化共价闭环的DNA分子；长片段引物延伸反应；DNA 3'-末端标记；定点突变位点的链延伸反应；DNA 5'-突出点位补平；第二链cDNA合成；原位检测凋亡相关DNApian段