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T4 RNA连接酶

更新时间:2022-05-03

简要描述:

T4 RNA连接酶由晶抗生物提供,包括T4 RNA连接酶说明书,以及T4 RNA连接酶级别,用途等详细介绍。

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T4 RNA连接酶


英文名称 : T4 RNA Ligase


分子量 : 43.6kDa,单体


级 别 : BR


保 存 : -20°C

来 源 : 含有T4噬菌体克隆基因63的大肠杆菌


浓 度 : 10u/ul


活性定义 : 是指在37℃、30分钟内将1nmol 5'-[32P]-(A)12-18转化为磷酸酶抗性形式所需的酶量


酶活性分析混合物 : 50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 10uM 5'-[32P]-(A)12-18(10uM 5'-末端)


保存液组分 : 20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA,0.5mM ELUGENT变性剂和50%(v/v)甘油


10×反应缓冲液 : 500mM HEPES-NaOH(PH8.0,25℃), 100mM MgCL2, 100mM DTT


抑制剂 : 金属螯合剂、SH基团修饰试剂


失 活 : 70℃加热10分钟


质量控制 : 测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染


备 注 : 反应体系中ATP的浓度取决于连接反应的类型,推荐的BSA反应浓度是0.1mg/ml


性 状 : 重组酶,催化ATP依赖的分子内和分子间磷酸二酯键连接(5'-磷酸基团和3'-羟基末端),底物分子为多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRNA和ssDNA,分子之间的最小的连接底物是核苷3',5'-二磷酸,而分子内连接的最小底物是8个碱基的寡核苷酸。配套提供反应缓冲液、ATP和BSA溶液。催化3'→5'磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羟基末端连接。作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸。随酶提供10X 反应缓冲液


用 途 : 生化研究。连接RNA和RNA ;RNA3'-末端标记胞嘧啶3',5'-双[a-32P]磷酸; tRNA的特异性修饰;合成寡核苷酸的环化;寡聚脱氧核糖核苷酸与单链cDNA连接,用于5'RACE(快速扩增cDNA末端)分析


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