末端脱氧核苷酸转移酶 | 9027-67-2

末端脱氧核苷酸转移酶 |  9027-67-2

其他中文名称 ： 末端转移酶；胸-腺五肽

英文名称 ： TDT

其他英文名称 ： Terminal Transferase；Terminal Deoxynucleotidyl Transferase

C A S ： 9027-67-2

分子量 ： 60000

保 存 ： -20°C

级 别 ： BR

来 源 ： 大肠杆菌细胞，含有编码牛胸腺末端脱氧核苷转移酶的基因

浓 度 ： 20u/ul

活性定义 ： 是指在37℃、60分钟内将1nmol脱氧核糖核酸掺入多聚核苷酸片段（吸附在DE-81上）所需的酶量

酶活性分析混合物 ： 66mM二甲胂酸钾（PH7.2），1mM CoCL2, 0.01%(v/v) Triton X-100, 10uM oligo(dT)10, 1mM dTTP和0.4MBq/ml[3h]-dTTP

保存液组分 ： 100mM 醋-酸钾（PH6.8)、2mM β-巯基乙醇，0.01%(v/v) Triton X-100和50%(v/v)甘油

5×反应缓冲液 ： 1M 二甲胂酸钾、125mM Tris，0.05%(v/v) Triton X-100，5mM CoCL2(PH7.2,25℃)

抑制剂 ： 金属螯合剂、铵、氯化物、碘化物和磷酸盐离子

失 活 ： 加入EDTA，70℃加热10分钟

质量保证 ： 测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染

注 意 ： 由于含有CoCL2，TdT反应缓冲液不能与下游应用兼容，需采用柱离心法或苯-酚/氯仿抽提及乙醇沉淀方法纯化反应混合物，除去CoCL2

性 状 ：悬浮液，重组酶。末端转移酶（Terminal transferase, TdT）是一种无需模板的DNA聚合酶，催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物。一般操作是：先在载体上打开一单个位点，把它与末端转移酶和某一dNTP（如dATP）一起保温以使添尾，另一待插入的外源DNApian段则用互补的用同法添dNTP（dTTP）用同法添尾。接着使上述两种都接上互补单链尾的DNApian段彼此退火，使形成一杂合载体来转化受体菌。杂合载体中的裂隙或切口可被受全菌所修复。

用 途 ： 生化研究。催化DNA的3'末端添加同聚物；DNA的3'末端标记