动物酶免试剂盒系由预包被猪蓝耳病毒重组蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清、血浆样本中猪蓝耳病毒抗体。 实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有猪蓝耳病毒抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后;
再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;
加入终止液终止反应后，产物变为;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪蓝耳病毒抗体。
下面让我们一起来了解一下动物酶免试剂盒的使用方法吧
一、样品准备
1.取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中，混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
二、检验方法
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀，置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7.洗涤，同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
