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羊小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒

更新时间:2022-06-28

简要描述:

羊小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒由晶抗生物提供,包括羊小反刍兽疫病毒抗体说明书,羊小反刍兽疫病毒抗体试剂盒国产/进口产品等详细介绍。

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羊小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒说明书

【产品名称】

通用名:

羊小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒

英文名:Test Kit for Antibodies to Goat Peste des Petits Ruminants Virus (ELISA)


【包装规格】 96T×1/盒、96T×2/盒
【预期用途】 小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)引起的一种急性接触性传染病,其特征为口腔、舌粘膜糜烂、流泪、流鼻液。本病的易感动物为山羊,也可感染绵羊、白尾鹿等,但对牛无感染性。

本试剂用于检测山羊血清中小反刍兽疫病毒抗体,可用于小反刍兽疫疫苗免疫效果评价。


【原    理】

本试剂盒系由预包被小反刍兽疫病毒重组抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测羊血清、血浆样本中小反刍兽疫病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有小反刍兽疫病毒抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有小反刍兽疫病毒抗体。


【试剂盒组成】

序号

名称

规格(96T×1

规格(96T×2

1.

酶标板

96T×1

96T×2

2.

酶标记物  (红盖)

11ml×1

11ml×2

3.

样品稀释液 (黄盖)

50ml×1

50ml×1

4.

20X浓缩洗涤液

40ml×1

40ml×1

5.

底物液A  (白盖)

6ml×1

11ml×1

6.

底物液B  (黑盖)

6ml×1

11ml×1

7.

终止液  (黄盖)

6ml×1

11ml×1

8.

阳性对照  (红盖)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

9.

阴性对照  (绿盖)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

10.

盖板膜

1

2

11.

自封袋

1

1

12.

说明书

1

1

 

【储存及有效期】 储存于阴凉干燥处(2-8℃),有效期期12个月。

包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。


【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。
【样品准备】

1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。

2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。

3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。


【检验方法】

1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。

2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。

3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。

4.混匀,置37℃(推荐水浴)反应30分钟。

5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。

6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。

7.洗涤,同步骤5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。


【参考值】 实验正常的情况下,阴性对照≤0.10,阳性对照≥0.6。
【检验结果的解释】

1.样品A值≥0.38为阳性;样品A值在0.2到0.38之间为可疑;样品A值<0.2为阴性。

2.本实验结果为阴性或可疑时表明羊只抗体水平不足,建议补打相应疫苗。


【试验方法的局限性】

该试验仅作为定性检测山羊血清、血浆中小反刍兽疫病毒抗体,根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。


【注意事项】

1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。

2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。

4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以*溶解。

5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。

6.用于检测的样品应保持新鲜。

7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

8.不同批号试剂组分不得混用。

 

 

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