小编见到许多很好的经历喜爱总结出来共享给我们，这儿给我们介绍一位培育触摸过近300种细胞的大师，共享关于细胞消化的一些经历。许多同学对细胞消化做了许多研讨，得出了许多有价值的经历，也见到许多人的困惑。其实细胞培育，尤其是细胞系的培育，就消化而言，不是太难，做得多了，长于总结经历，就能把细胞越养越好。一般的程序过程，细节操作，我这儿就不讲了，只讲一些根本操作背面的知识，假如不对之处，欢迎纠正，一同评论：
1、其实绝大部分细胞消化的时分是只需用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法核算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min满足消化细胞（绝大部分1min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，接连这样传代，对细胞损伤很大。简略的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37度消化。
2、什么算是消化好了呢？不是细胞悉数成距离散布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼调查贴壁细胞层，只需能移动了，八成呈沙壮移动，其实现已能够了，许多人喜爱把细胞消化或许吹打成*别离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培育基质资料的附着现已消失了，细胞之间的附着也现已消失了，细胞现已独立散布了（尽管没有呈现很广的离散散布）。这个时分应该停止消化，不要等到看到镜下一切细胞都别离得非常好，空隙很大，才停止。细胞就是*成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会集合，这个是贴壁培育的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，不管死活的细胞都是如此，你能够测验，预备100%的单个细胞悬液，贴壁后调查细胞，仍然是几个几个细胞集合在一同。一些悬浮培育细胞也是如此，简单集合，不要去测验过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液
不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的过错，认为悬浮培育就是一个一个分隔。细胞只需能从基质上脱离下来，这个时分即使是成片的（比方Calu-3细胞），吹打不超越20次后（一般10次即可），成小规模集合（10个细胞左右），是正常的，不要试图再去延伸消化时刻，或许象有的同学那样吹打1h，等待单细胞悬液呈现。