ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对实验的检测作用影响较大，如不留意，有可能导致显色不全、花板等成果。
将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给同行带来一些启示，进步实验质量。
下面剖析Elisa实验操作中可能影响成果的原因，并给出相应的解决办法
一、挑选试剂
挑选质量的检测试剂，严厉依照试剂阐明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
二、 孵育
可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸腾，吸附于孔壁，难于清洗*; 2) 孵育时刻人为延伸，导致非特异性结合紧附于反响孔周围，难以清洗*。
解决办法：
1) 贴封片或加盖; 2) 按阐明过程严厉控制操作时刻。
三、洗板
可能原因：
1) 选用手艺洗板，孔与孔之间液体穿插。 2) 选用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*;洗板针阻塞，抽吸不*;洗板不畅，导致洗板作用差。 3) 反响板过多形成洗板等候时刻长。
解决办法：
1) 确保洗液注满各孔，洗板针疏通，洗完板后在吸水纸(挑选干净、无或少尘的吸水资料)上轻轻拍干; 2) 合理安排，或多用几台洗板机。
四、加样
可能原因：
1)血清或血浆标本别离欠好即进行加样; 2)手艺操作中，加样板过多形成加样后放入孵箱前等候时刻过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅起孔外。
解决办法：
1)标本为血清：将血液先天然寄存1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆：有必要使用含抗凝剂的血液标本搜集管，采血后有必要当即倒置采血管混合5-10次，放置一段时刻后，3000rpm离心15分钟;若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要储存，则置于-20℃的低温冰箱内。 2)加样后及时放入孵箱。3)加酶试剂后用吸水纸在酶标板外表轻拭吸干。 4)如果选用AT或其他全自动加样，挑选FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5)标本较多时，请分批操作。