人eNOS elisa试剂盒

产品名称：人eNOS elisa试剂盒

英文名称：Human eNOS ELISA Kit

实验类型：双抗体夹心法

产品品牌：晶抗生物

保存温度：2-8 ℃

产品规格：96T/48T

产品包装：液体盒装

使用范围：仅供科研使用，不得用于临床

产品用途：用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性

操作步骤：

1、使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。

4、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5、每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7、每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育5分钟。避免光照。

8、取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9、在450nm波长处测定各孔的OD值。

操作注意事项：

1、试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6、底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

7、加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

一般来讲，96T能检测90个样本，48T能检测42个样本，这里面需要用标样来做标准曲线，所以各位需要做实验的老师们，请在购买ELISA试剂盒的时候注意，需要做多少个样本，在决定买多大规格的试剂盒，以免做实验时出现试剂盒不够用或者浪费！

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