更新时间:2024-06-14
口腔鳞状细胞癌(OSCC)是的一个突出子集,头颈癌是第六大常见癌症。发生OSCC的主要危险因素是致癌物暴露,将头颈癌的这一亚群与人瘤病毒诱导的头颈癌区分开来。尽管在检测、手术、化疗和放疗方面取得了进展,但OSCC的预后几十年来一直保持稳定。此外,在诊断时,大约三分之二的OSCC患者患有局部晚期疾病,导致发病率和死亡率增加。
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基本信息
细胞名称:moc1/moc2小鼠口腔鳞状细胞癌
细胞品系:C57BL/6 Cxcr3-/-
细胞来源:国外
细胞鉴定:STR鉴定已通过
细胞形态:淋巴母多角形细胞样,贴壁+悬浮生长
培 养 基:DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)(BasMed-AW-013)+FBS 10% + P/S1%500ML培养基:IMDM:F10/F12=2:1313ml:157ml培养基+FBS10%(50ml)+2.5mg/500ml胰岛素+20ug/500ml+2.5ug/500ml EGF+ P/S 1% 双抗,1%。
培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%
细胞背景:口腔鳞状细胞癌(OSCC)是头颈癌的一个突出子集,头颈癌是六大常见癌症。发生OSCC的主要危险因素是致癌物暴露,将头颈癌的这一亚群与人瘤病毒诱导的头颈癌区分开来。尽管在检测、手术、化疗和放疗方面取得了进展,但OSCC的预后几十年来一直保持稳定。此外,在诊断时,大约三分之二的OSCC患者患有局部晚期疾病,导致发病率和死亡率增加。
细胞用途:仅供科研使用
注意事项
1. MOC1细胞活性特别高,增值速度非常快,不建议传代密度太大,而选择稀一点重铺,等长满80%左右传代的时候,很难消化下来,建议加入0.25%EDTA的进去后充分混匀所有细胞都接触到,放置到培养箱进行消化,时长大约是3-4分钟左右后拿出来
2. 在培养器皿的侧边进行拍打帮助细胞脱落,拍打过程大约持续2分钟左右才会脱落大部分细胞,如果脱落比例还不是很多,也可以重新放回培养箱继续消化1-2分钟后再次拿出来进行拍打脱落,等80-90%细胞都脱落后再终止消化,离心重悬再重新铺瓶,分散均匀。
3. MOC2细胞贴壁性和常规细胞类似没有特别牢固。倍增周期也没有MOC1快。采用常规消化方法处理。
常温发货
收到后T25瓶消毒再放置培养箱静置2-3小时后观察密度和状态拍照2-3张反馈给销售,密度达标就可以传代。前期传代比例1:2,等再次长满后传代时建议冻存其中一整瓶成1个1ml冻存管,另外一瓶继续传代,反复冻存2-3只后才扩增做实验,以防突发情况引起断种。
干冰发货常规细胞发货冻存管2只,复苏1只,另外一只备用,第一个复苏不成功时严格按照厂家要求复苏第二个,均没有复苏成功的情况即时留存复苏照片通知我们。
贴壁细胞
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶/6cm培养皿中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
4. 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
5. 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的培养基来培养细胞。
悬浮细胞
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×10⁵~1×10⁶个/mL(不同细胞对密度要求不同)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:4的比例进行。
生物安全
1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。