我们在运用ELISA试剂盒96孔板的实验测定的时分，常发现有“边缘效应"，也即是外周孔显色较基地孔深。经研讨证真实温育中的热力学梯度或许是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的惯例ELISA测定中，将板从室温（一般在25℃摆布）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与基地孔之间或许存在一热力学梯度。因此运用水浴或在将反应溶液参与至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地扫除“边缘效应"，而且可进步测定的重复性。
ELISA试剂盒即是在实验中，一定有运用微量加样器参与样本的过程。提示留心：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅起和发作气泡,ELISA试剂盒太快的话无法确保微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易致使非特异吸附,溅起会对邻近孔发作污染,呈现气泡则反应液界面有差异,所以，有时分一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，一般即是上述加样及试剂的过错所形成的。
