人（Human）S100 钙结合蛋白A9（S100A9）ELISA 检测试剂盒使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预
先包被S100钙结合蛋白A9（S100A9）抗体的包被微孔中，依次加入
标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物
TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下
转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的S100钙结合蛋白A9
（S100A9）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD
值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞
刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地
分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟
取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于
-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的
浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶*溶解
后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 浓度为0 的S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明
书操作时样本已经稀释5 倍，zui终结果乘以5 才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
