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上海晶抗生物鸡ELISA试剂盒实验原理介绍
更新时间:2026-02-02   点击次数:12次

上海晶抗生物鸡ELISA试剂盒,核心是酶联免疫吸附测定,专门针对鸡源生物样本(血清、血浆、组织匀浆、卵清、细胞上清等),定量检测鸡体内的细胞因子、激素、抗体、病原抗原、营养指标、药物残留等靶标分子,原理与通用 ELISA 一致,但包被抗原 / 抗体、标准品、种属特异性二抗均为鸡种属特异性,避免与其他物种交叉反应,保证检测精准。

上海晶抗生物鸡ELISA试剂盒实验原理介绍

下面从核心原理、四大经典方法原理、实验通用流程、鸡试剂盒专属特点完整讲解,通俗易懂,适配实验实操理解。

一、ELISA核心总原理

ELISA 的本质是抗原 - 抗体特异性结合 + 酶催化底物显色的信号放大,两大核心不可分割:

免疫特异性:抗原与对应抗体只发生一对一的特异性结合,如同钥匙配锁,鸡源靶标只会与试剂盒内的鸡特异性识别分子结合,非目标物质不结合、不干扰。

酶促信号放大:结合的免疫复合物上标记辣根过氧化物酶(HRP) 或碱性磷酸酶(AP),酶能催化无色底物快速生成有色产物,产物颜色深浅与样本中靶标分子的含量成正比,通过酶标仪测吸光度(OD 值),对照标准曲线即可计算出样本中靶标的精确浓度。

简单总结:靶标越多 → 结合的酶标物越多 → 显色越深 → OD 值越高 → 定量结果越高。

二、鸡 ELISA 试剂盒的 4 种方法原理

鸡 ELISA 根据检测靶标不同,分为测抗体、测抗原、小分子、大分子四类,对应 4 种经典方法,也是市面上鸡试剂盒主流类型:

1. 间接 ELISA(:检测鸡源抗体)

适用靶标:鸡抗体、鸡新城疫抗体、鸡传染性法氏囊抗体、鸡减蛋综合征抗体、鸡支原体抗体等禽病特异性抗体,用于免疫效果评价、疫病筛查。

实验原理流程:

包被:微孔板预包被鸡特定病原的纯化抗原(如新城疫病毒抗原),固相化在孔底。

加样:加入待检鸡样本(血清),样本中的鸡特异性抗体与包被抗原结合。

加酶标二抗:加入酶标记的抗鸡 IgG 二抗(种属核心,只识别鸡 IgG,不识别鸭、鹅、哺乳动物抗体),二抗与结合在抗原上的鸡抗体结合。

加底物显色:酶催化底物显色,终止液终止反应,测 OD 值。

定量:OD 值越高,说明鸡体内针对该病原的抗体含量越高。

2. 双抗体夹心法(:检测鸡源大分子抗原 / 蛋白)

适用靶标:鸡白介素 (IL-1β、IL-6)、鸡肿瘤坏死因子 (TNF-α)、鸡生长激素、鸡胰岛素、鸡卵清蛋白、鸡传染性支气管炎病毒抗原等大分子蛋白、细胞因子、病原抗原。

实验原理流程:

包被:微孔板预包被鸡靶标蛋白的捕获抗体(单抗 / 多抗,鸡种属特异)。

加样:加入鸡样本,样本中的靶标抗原与捕获抗体特异性结合。

加酶标检测抗体:加入酶标记的鸡靶标检测抗体,与抗原的另一位点结合,形成捕获抗体 - 靶标抗原 - 酶标检测抗体的 “三明治" 复合物。

底物显色、测值:显色深浅与抗原浓度正相关,计算样本抗原含量。

核心特点:只能测分子量≥10kDa 的大分子,小分子(激素、药物残留)无法用此法,因为小分子只有一个结合位点,无法形成夹心结构。

3. 竞争法(专用:检测鸡源小分子物质)

适用靶标:鸡雌二醇、睾酮、孕酮、甲状腺激素、磺胺类药物残留等小分子激素、兽药、真菌毒素。

实验原理流程(两种形式,试剂盒常用酶标抗原 / 酶标抗体竞争):

包被:微孔板包被鸡小分子靶标的特异性抗体。

加样 + 加酶标抗原:待检鸡样本中的游离小分子抗原,与酶标记的小分子抗原,竞争结合孔底的有限抗体位点。

结合规律:样本中游离小分子越多,占据的抗体位点越多,酶标抗原能结合的位点就越少 → 显色越浅。

定量:OD 值与靶标浓度成反比,颜色越淡,样本中小分子含量越高。

4. 捕获法(专用:检测鸡 IgM 类早期抗体)

适用靶标:鸡疫病早期感染 IgM 抗体(IgM 是机体感染后出现的抗体,用于早期快速诊断)。

上海晶抗生物以诚信为本,努力打造的品牌,为您提供的鸡ELISA试剂盒售中、售前、售后服务,具有的技术团队,把产品引入国内市场,满足国内广大客户的需求,在二十一世纪生命科学蓬勃发展的时代,将紧跟生命科学的发展动态,为广大科研学者探索生命的奥秘而奉献绵薄之力!

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