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上海晶抗生物为您介绍ELISA试剂盒的组成
更新时间:2026-01-06   点击次数:51次


上海晶抗生物
ELISA试剂盒的组成会根据检测目标物、试剂盒类型(如间接法、双抗体夹心法、竞争法) 略有差异,但核心组分基本一致,以下是通用的完整组成清单,同时标注各组分的功能和适用场景:

上海晶抗生物为您介绍ELISA试剂盒的组成


一、 核心检测试剂

预包被板(Pre-coated Microplate)

即吸附了捕获抗体(夹心法)、抗原(间接法)或封闭剂的 96 孔酶标板,是 ELISA 反应的载体。板条可拆分,方便按需使用。

标准品(Standard)

已知浓度的目标分析物(如细胞因子、激素、抗原等),通常为冻干品或液体,需梯度稀释后绘制标准曲线,用于定量待测样本。

检测抗体 / 酶标二抗

夹心法:提供生化检测抗体,可与目标物特异性结合;

间接法:提供酶标记二抗(如 HRP 标记羊抗人 IgG);

部分试剂盒会搭配酶结合物(酶标记的抗原 / 抗体)。

底物溶液(Substrate Solution)

酶促反应的显色底物,常见组合为 TMB 底物液 A+B(辣根过氧化物酶 HRP 专用)或 PNPP 底物液(碱性磷酸酶 AP 专用),反应后会呈现蓝色(TMB)或黄色(PNPP)。

终止液(Stop Solution)

通常为酸性溶液(如 2M H₂SO₄),用于终止酶促显色反应,使 TMB 底物的蓝色转变为稳定的黄色,便于酶标仪读数。

二、 辅助试剂(Sample Diluent)

用于稀释待测样本(血清、血浆、细胞培养上清等),维持样本的稳定性,减少基质效应干扰。

洗涤液(Wash Buffer)

通常为含 Tween-20 的磷酸盐缓冲液(PBS-T),用于洗去孔内未结合的游离物质,降低非特异性结合背景。一般为浓缩液,使用前需用蒸馏水稀释。

封闭液(Blocking Buffer)

若试剂盒未提供预包被板,会配套封闭液(如 5% 脱脂奶粉、BSA 溶液),用于封闭酶标板的空白位点,减少非特异性吸附。

三、 耗材与文件

封板膜(Plate Sealer)

分为粘性封板膜和透气封板膜,前者用于孵育时防止液体蒸发和交叉污染,后者用于洗涤步骤。

产品说明书(Instruction Manual)

包含详细的实验步骤、试剂配制方法、结果计算方式、注意事项及质控标准,是实验操作的核心指导文件。

补充说明

不同物种的 ELISA 试剂盒(如猪、牛、人源),核心组成一致,差异仅在于抗体 / 抗原的物种特异性。

定量 ELISA 试剂盒会配套完整的标准品梯度,定性试剂盒可能简化标准品配置。

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