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上海晶抗生物为您详细讲解血清冻存方法及注意事项
更新时间:2023-10-23   点击次数:571次

血清保存注意事项:

(1) 血清需求长时刻保存的血清有必要储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时刻切勿超越1个月。因为血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,有必要预留必定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

(2) 热灭活是指56℃, 30分钟加热已冻结的血清。加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活。除非有必要,一般不主张作此热处理,因为热处理会构成血清沉淀物明显增多,并且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞缩短, 肥大细胞和血小板开释组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。

(3) 瓶装血清冻结需选用逐渐冻结法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待悉数溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(当心勿构成气泡),使温度与成分均一,削减沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃冻结,这样因温度改变太大,简单构成蛋白质凝集而呈现沉淀。

(4) 一般厂商供给的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。

(5) 血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及冻结后血清中纤维蛋白构成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理。 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的构成会明显增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞成长,但如果置疑血清质量,则应立即停止使用,替换另一批号的血清。

(6) 血清 切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,一起血清中的有效成分会破会而影响血清质量。


血清冻存方法:

1. 将血清从冷冻箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室温下使之全溶。但有必要注重的是,溶解进程中有必要规矩地摇晃均匀。

2. 血清冻住后发现有絮状沉积物出现,该怎样处置。 

3. 血清中沉积物的出现有许多缘由,遍及的缘由是因为血清中脂蛋白的变性构成的;而血纤维蛋白在血清冻住后,也会存在于血清中,亦是构成血清沉积物的首要缘由之一。但这些絮状沉积物,并不影响血清自身的质量。若您欲去掉这些絮状沉积物,可以将血清分装至无菌离心管中,以400g略微离心,上清液即可接着参与培育基内一起过滤。不建议您以过滤的办法去掉这些絮状沉积物,因为它可能会堵塞您的过滤膜。


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