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上海晶抗生物ELISA试剂盒原理与注意事项
更新时间:2022-06-12   点击次数:837次

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ELISA试剂盒实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛肺炎支原体抗原(MPAg)水平。用纯化的牛肺炎支原体(MP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肺炎支原体抗原(MPAg),再与HRP标记的肺炎支原体(MP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的。颜色的深浅和样品中的肺炎支原体抗原(MPAg)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛肺炎支原体抗原(MPAg)浓度。


ELISA试剂盒注意事项

1. 由于底物显色剂对光及其敏感,因此要避光保存。

2. 检测吸光度前应将酶标仪打开,将其预热30min以上。

3. 孵育的时间应该严格按照试剂盒说明书上的时间为准。

4. 要尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。

5. 对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。

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