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◆注意事项：
1、标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP,也会发作假阳性反响。保存过久可发作聚合在ELISA中可使本底加深。
2、冻结标本溶解后，蛋白质部分浓缩，分布不均，应充沛混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠混合，不要在混匀器上激烈震动。
3、污浊或有沉积的标本应先离心或过滤，弄清后再检测。
4、重复冻融会使蛋白效价降低，所以代测样本如需保存作屡次检测，宜少数分装冰存。
◆ELISA需要遵从的几个细节关键：
1.抗原或抗体能吸附于固相载体外表，并坚持其免疫学活性；
2.抗原或抗体可通过共价键与酶衔接构成酶结合物，而此种酶结合物仍能坚持其免疫学和酶学活性；
3.酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据参加底物的色彩反响来断定是否有免疫反响的存在，并且色彩反响的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，可根据已知浓度的抗原或抗体的色彩反响的深浅绘制规范曲线并依此计算出不知道样品中抗体或抗原的浓度。
除了以上内容，在ELISA试剂盒细节中，稀释前、后的样品有必要充沛混匀，一切试剂在加样前也须摇匀，以确保试验的均一性。
