ELISA试剂盒实验的原理好像很简朴，不过乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，间中夹杂着洗刷和关闭。假定您的布景过高，怀疑关闭不充分，那么您可以检验运用更高浓度的关闭液，或恰当延伸关闭时间。血清组分的内在多样性可使它有用阻挠许多不同类型的分子相互作用。另一个挑选是运用蛋白和非离子型去污剂这两种关闭液，ELISA试剂盒后者可帮助洗刷过程中的关闭。处理这个题目的一种方法是运用鸡或鱼的正常血清。好的关闭液应下降非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。在实验结束时，咱们是否能获得有意义的信息，这在很大程度上取决于成果的信噪比。

假定您的ELISA试剂盒不幸地碰到了高布景，那么也无需太担忧，依次检查ELISA体系中的组分，并扫除可能存在的标题。记住，非特异的抗体结合会添加布景。不过，它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。为了避免这一点，切勿运用过多的一抗或二抗。

ELISA试剂盒假定布景过高，而您怀疑洗刷不行时，可以检验添加洗刷次数。这种关闭液廉价、不乱，在去除洗刷过程中的一些非特异结合上很有用。假定浓渡过高，ELISA试剂盒或许未准确稀释，则会导致高布景。常用的蛋白关闭液包括牛血清白蛋白（BSA）、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。关闭液的作用是让不相关的蛋白占有微孔板中埋伏的结合位点。
请勿运用高浓度（正常浓度为0.01-0.1%），它会下降特异结合，发生假阴性。这就下降了可发生信号的抗体非特异结合的机遇。ELISA试剂盒现在主要有两种类型的关闭液：蛋白和非离子型去污剂。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。假定您一向被布景标题所困扰，那么或许您该花些时间来优化关闭液。