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小鼠γ干扰素(IFN-γ)酶联免疫分析ELISA试剂盒
更新时间:2015-09-16   点击次数:912次

小鼠γ干扰素(IFN-γ)酶联免疫分析
使用目的:
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中γ干扰素(IFN-γ)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠γ干扰素(IFN-γ)水平。用纯化的小鼠γ干扰素(IFN-γ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入γ干扰素(IFN-γ),再与  HRP标记的γ干扰素(IFN-γ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB显色。TMB在   HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的γ干扰素(IFN-γ)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠γ干扰素(IFN-γ)浓度。
试剂盒组成
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因   NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔
显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液    50μl,终止反应(此时蓝色立转)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止
小鼠γ干扰素(IFN-γ)酶联免疫分析注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本  OD值大于标准品孔*孔的 OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
小鼠γ干扰素(IFN-γ)酶联免疫分析保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月

 
 

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